如何选择紫外分光光度计的参比溶液

　　由于参比溶液吸收一定量的光，通常需要在比色法测量前扣除这种吸收，以便更接近被测组分的吸收值，这样就可以从校准曲线上计算出被测组分的浓度。紫外分光光度计在进行光度测量时，利用参比溶液来调整仪器的零点，可以消除由于吸收池壁和溶剂对入射光的反射和吸收而产生的误差，并扣除干扰的影响。参考溶液的选择可以根据以下条件进行。

　　紫外分光光度计参比溶液的选择

　　1、溶剂

　　试样成分简单，共存的成分对测定的光的波长没有吸收。

　　2、试剂

　　色素或其他试剂对测定波长的吸收，按相同条件进行显色反应，不需要加入试样的试剂。

　　3、试液

　　样品基质溶液在测定波长处有吸收，显色剂本身无色，可按与显色反应相同的条件处理样品，只是不加显色剂。

　　4、平行操作参考

　　用不含被测组分的试样，在与被测样品相同的条件下同时进行，得到平行操作参比溶液。

　　例如，在监测某种药物浓度时，将正常人的血样和待测血液浓度的血样平行处理，前者得到的溶液可作为平行操作参比溶液。

　　注意事项

　　1、试剂和显色剂无色时，可采用蒸馏水作为参比溶液。

　　2、显色剂有颜色时，可以选择不加样品的试剂空白溶液作为参比溶液。

　　3、显色剂是无色的，而试液中存在其他有色离子时，可用不含显色剂的试液作为参比溶液。

　　4、显色剂与供试品溶液都有颜色时，可在供试品溶液中加入适当的掩蔽剂，将被测组分掩蔽起来，使之不再带有显色剂，而显色剂和其他试剂则按供试品溶液的测定方法加入，作为参考溶液，这样可消除显色剂与某些共存组分的干扰。

　　5、改变试剂的加入顺序，使被测组分不发生颜色反应，此溶液可作为消除干扰的参考溶液。